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21 学术座谈会(下)

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个识别位点,但因为DNA结合元件的相互影响,ZFN同巨型核酸酶差别不大,两种方法的精确度都是不可预测的。”

“其三,转录激活样效应因子核酸酶,简称TALEN,TALEN是经过基因工程改造后的可以切割特定DNA序列的限制酶。TALEN是通过将一个TAL效应子DNA结合结构域与核酸酶的一个DNA切割结构域融合而获得的。TALENs可以被设计成与几乎任何所需的DNA序列结合,因此当与核酸酶结合时,DNA可以在特定位置进行切割。TALEN比前两种方法更高效,而且准确率也是所有方法中最高的,但遗憾的是,TALEN只能针对特定的DNA进行切割,所以这导致其成本太高。”

“最后一种方法,那就是成簇规律间隔短回文重复技术,CRISPR-Cas是原核生物免疫系统,赋予原核生物对如存在于质粒和噬菌体中的外来遗传物质的抗性,是一种获得性免疫系统,携带间隔序列的RNA有助于Cas蛋白识别并切割外源致病DNA。其它RNA指导的Cas蛋白切割外源RNA,CRISPR核酸酶相比TALEN的精确度略低,但它确有一个其他三种方法都不具备的优势,那就是可以使用其~80nt CRISPR sgRNA直接定位不同的DNA序列,以此可大大节约成本的同时,还能大大提高时效性。所以,如果我是基因能量公司高层,肯定会选择成簇规律间隔短回文重复技术。”

就在秦然讲解的时候,不少生物基因学暗暗点头,他们听得出,秦然不是说大话,他真的自学过生物基因学,并且在生物基因学上的造诣不低,水平至少和生物基因学一级高工持平。因为随便去拉十个普通生物基因学的研究人员,恐怕有九个都不能将基因编辑的四种方法阐述清楚。

但秦然的讲解还没有结束。

“相比巨型核酸酶和锌指核酸酶,CRISPR-Cas的精确度已经很高了,但脱靶效应仍然是基因编辑中最大的副作用......”

此时有专家打断秦然:

“CRISPR-Cas9技术发明人之一詹妮弗·杜德纳三年前已经证实,抗 CRISPR蛋白能将 CRISPR导致的脱靶效应降低四分之一,其中“AcrllA4”的蛋白甚至能将脱靶效应发生率减少 4倍,而整个过程中目标位点的基因编辑没有受到丝毫影响,还有”

秦然不紧不慢抢过话头:“你是想说去年3月18日,约瑟夫·邦迪-德努米团队在李斯特细菌中发现了


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